Kalkulator Konsentrasi Protein

Kategoria: Biologi
- April 04, 2025
| |
Nilai tipikal berkisar antara 0.5 hingga 2.0
Kuvet standar memiliki panjang jalur 1 cm
Jika sampel diencerkan sebelum pengukuran (misalnya, 5 = pengenceran 1:5)

Konsentrasi protein menggunakan absorbansi pada 280 nm (A280) ditentukan menggunakan Hukum Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

di mana:

  • \( C \) = Konsentrasi protein (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbansi pada 280 nm
  • \( \epsilon \) = Koefisien ekstinksi (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Panjang jalur dari kuvet (cm)

Apa itu Kalkulator Konsentrasi Protein?

Kalkulator Konsentrasi Protein membantu menentukan konsentrasi protein menggunakan berbagai metode, termasuk:

  • Absorbansi pada 280 nm (A280): Metode cepat dan tidak merusak yang berdasarkan asam amino aromatik.
  • Uji Bradford: Metode kolorimetri menggunakan pengikatan pewarna.
  • Uji BCA (Asam Bikinchoninik): Metode yang bergantung pada reduksi tembaga dan deteksi kolorimetri.
  • Uji Lowry: Pendekatan yang sudah mapan menggunakan interaksi protein-tembaga.

Cara Menggunakan Kalkulator

Ikuti langkah-langkah ini untuk menghitung konsentrasi protein:

  • Pilih metode pengukuran (A280, Bradford, BCA, atau Lowry).
  • Masukkan nilai yang diperlukan seperti absorbansi, faktor pengenceran, dan koefisien ekstinksi (jika diperlukan).
  • Jika menggunakan metode kurva standar (Bradford, BCA, atau Lowry), masukkan parameter kurva.
  • Klik tombol "Hitung" untuk mendapatkan hasil konsentrasi.

Manfaat Menggunakan Kalkulator

  • Menghemat waktu dengan mengotomatiskan perhitungan konsentrasi.
  • Mendukung berbagai metode pengukuran untuk fleksibilitas.
  • Mencakup kalkulator pengenceran untuk menyiapkan konsentrasi tertentu.
  • Mengurangi kesalahan manusia dalam perhitungan manual.

FAQ

1. Seberapa akurat metode Absorbansi (A280)?

Metode A280 umumnya akurat untuk protein murni tetapi dapat dipengaruhi oleh kontaminan seperti asam nukleat.

2. Bisakah saya menggunakan Uji Bradford untuk semua protein?

Uji Bradford bekerja dengan baik untuk sebagian besar protein tetapi dapat memberikan hasil yang bervariasi tergantung pada komposisi protein.

3. Apa keuntungan dari Uji BCA?

Metode BCA lebih kompatibel dengan deterjen dan memiliki rentang linier yang lebih luas dibandingkan Bradford.

4. Bagaimana cara memilih koefisien ekstinksi yang benar untuk A280?

Gunakan nilai yang dipublikasikan untuk protein yang diketahui, atau hitung koefisien ekstinksi berdasarkan komposisi asam amino.

5. Mengapa saya perlu faktor pengenceran?

Jika sampel Anda diencerkan sebelum pengukuran, Anda harus mengalikan konsentrasi yang dihitung dengan faktor pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi akhir yang benar.